Proyectos
Evaluación de la Transferencia de CO2 al Medio de Cultivo en un Biorreactor Tipo Spinner para el Cultivo de Fibroblastos
Resumen
En el grupo de trabajo en ingeniería de tejidos se han elaborado soportes de colágeno tipo I, que al ser sembrados con fibroblastos, aislados de mucosa oral o dermis humanas, permiten la formación de tejido con características histológicas similares a las de los tejidos conectivos naturales. Estos cultivos se han llevado a cabo en cajas individuales que se mantienen en condiciones estáticas durante su incubación, lo cual algunas veces conduce a un crecimiento no homogéneo de las células dentro de los soportes. Adicionalmente, las cantidades de soportes sembrados con células que se pueden cultivar en este sistema son limitadas, incrementando el tiempo necesario en su obtención. Para poder obtener cantidades mayores de tejido artificial en un menor tiempo y homogeneizar la distribución de las celulas en los soportes, fue necesario desarrollar un método diferente al cultivo en cajas individuales que además sea escalable. Viendo esta necesidad, el grupo desarrolló un biorreactor spinner, en trámite de obtención de patente, en el cual se pueden cultivar hasta 24 mallas de colágeno sembradas con fibroblastos. Su caracterización inicial indica que cuando se carga con soportes de colágeno, medio de cultivo, fibroblastos y se incuba; el pH del medio en el biorreactor sube de 7.2 a 7.8-8.0. En estos valores altos de pH las células se estresan y responden produciendo ácido láctico para acidificar el medio. Lo anterior lleva a que no se consuma glutamina y en consecuencia, a que no se sinteticen proteínas necesarias para la producción y recambio de matriz extracelular. El incremento inicial en el pH puede deberse a que el método empleado para suministrar CO2 al medio de cultivo no esta funcionando. En el diseño inicial, se pensó que el flujo de una mezcla de aire con CO2 al 5% a través del biorreactor originaba una presión parcial de este gas sobre el medio de cultivo, suficiente para solubilizar la cantidad de CO2 requerida para controlar las fluctuaciones del pH. Debido a que los datos del grupo muestran que ésto no sucede; en este proyecto se modificará el método de aireación y se estudiarán las modificaciones que esto introduce en la concentración de CO2 disuelto y en el pH, a lo largo del biorreactor. Una vez controlados estos parámetros se evaluará el crecimiento celular y se medirá el consumo de glucosa y glutamina.
Convocatoria
Nombre de la convocatoria:II CONVOCATORIA DE REFINANCIACIÓN A PROYECTOS DE INVESTIGACIÓN. DIB - 2008
Modalidad:II CONVOCATORIA DE REFINANCIACIÓN A PROYECTOS DE INVESTIGACIÓN. DIB - 2008
Responsable