La Brucelosis bovina (BB) es una enfermedad zoonótica causada por bacterias del género Brucella, que genera un gran impacto económico y sanitario en Colombia, al afectar la productividad ganadera y representar un riesgo para la salud pública. Actualmente, el diagnóstico rutinario de la BB se basa en pruebas serológicas, útiles como métodos de tamizaje, que requieren de pruebas confirmatorias como el cultivo bacteriológico y/o métodos moleculares basados en PCR. Sin embargo, este tipo de pruebas suelen presentar altos costos y necesitan ciertos requerimientos técnicos, lo que limita su aplicación en campo. Ante este tipo de desafíos los métodos basados en Amplificación Isotérmica Mediada por Bucle (LAMP) han surgido como una alternativa prometedora para el diagnóstico de la BB, ya que son sencillos, rápidos, sensibles, específicos, de bajo costo y no requieren de personal especializado. No obstante, el desarrollo de este tipo de métodos requiere de un proceso de validación que demuestre de manera objetiva su adecuación para el propósito previsto. Para ello, se requieren herramientas de aseguramiento metrológico como los Materiales de Referencia a nivel de ácidos nucleicos (MR) y métodos de medición robustos, que permitan evaluar los resultados obtenidos, garantizando su reproducibilidad, precisión y confiabilidad. En este contexto, el objetivo del presente proyecto es desarrollar un Material de Referencia (MR) a partir de ADN genómico de Brucella abortus, caracterizado mediante PCR tiempo real (qPCR) y PCR digital (dPCR), con el cual se optimizará un método de detección por PCR LAMP a partir del MR desarrollado, con el propósito de fortalecer las capacidades diagnósticas de la Brucelosis bovina en Colombia.