Las infecciones del tracto respiratorio superior y las infecciones causantes de diarreas son las enfermedades en la edad infantil, más frecuentes e impactantes desde el punto de vista médico y económico. De las últimas, los rotavirus son el principal agente etiológico de diarreas en niños menores de tres años en todo el mundo.En el caso de Colombia, estudios previos realizados en nuestro laboratorio sugieren una alta incidencia de infeccion rotaviral en infantes de la ciudad de Bogotá(31e). Igualmente son causa importante de diarrea infantil severa en las crías de muchas especies de animales. No se conoce el mecanismo utilizado por los rotavirus para infectar la célula, ni se conocen con exactitud las moléculas receptoras de la célula que los rotavirus utilizan para infectarla. Este es uno de los factores que ha impedido desarrollar vacunas o métodos efectivos para combatir la enfermedad. Esta propuesta de investigación se enmarca dentro de un gran objetivo: conocer las interacciones iniciales rotavirus-célula hospedera, que conducen a una infección productiva, específicamente las relacionadas con la unión a proteínas celulares de superficie que los rotavirus utilizan como receptores para infectar. Por estudios realizados en células MA104 se sugiere que la proteína de choque térmico HSC70 (heat shock cognate 70) (31d, 31c, 1a) participa en la infección junto con la integrina b3 (1a, 31b); sin embargo, es importante verificar si el gen de la HSC70 modifica su expresión durante la infección del rotavirus a la célula. De confirmarse, el resultado posibilitaría trabajos posteriores que determinen si in vivo también son utilizadas como moléculas receptoras para los rotavirus y a la vez esto permitiría, en un futuro, diseñar vacunas o tratamientos para combatir la enfermedad. La metodología básica consiste en generar dos anticuerpos (Ac) policlonales utilizando como antígeno a) la proteína HSC70 recombinante humana b) una mezcla de virus de la cepas Humanas (Wa), bovino (Rf), Porcino (Ym) y de mono Rhesus (RRV). Estos Acs se utilizarán en técnicas inmunológicas para evaluar la cinética de expresión de la proteína HSC70 en el citoplasma y en la membrana citoplasmática luego de infectar las células MA104 con una cepa de rotavirus. Como control se utilizarán células sin infectar y se verificará la infección con rotavirus utilizando los Acs policlonales generados contra éstos. El trabajo se enmarca como investigación de punta y permitirá apoyar la realización de un trabajo de tesis de Maestría de la Facultad de Medicina, la presentación de los resultados en un congreso nacional, conferencias dirigidas a estudiantes de pre y de postgrado y a la comunidad científica y académica de la Universidad. DESCRIPCION DEL PROYECTO PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA No se conoce el mecanismo utilizado por los rotavirus para infectar la célula, ni se conocen con exactitud las moléculas receptoras de la célula que los rotavirus utilizan para infectarla. Por estudios realizados utilizando inhibidores metabólicos, así como por la caracterización bioquímica de los receptores celulares, se ha podido concluir que los receptores para rotavirus en células epiteliales MA104 (derivadas de riñón de mono), involucran a una o varias glicoproteínas N-glicosiladas, cuya función de receptor depende de esfingolípidos y de la presencia de colesterol (1a, 31a). Estudios realizados en células MA104 sugieren que la proteína de choque térmico HSC 70 (heat shock cognate 70) (1a, 31c, 31d) y la integrina b3(1a, 31b) participan en la infección en un paso posterior a la unión, probablemente en la penetración. Sin embargo, es importante verificar si el gen de la HSC70 modifica su expresión luego de infectar la célula con rotavirus. Este trabajo es la continuación de trabajos previos cuyos resultados se publicaron en revistas de alto prestigio internacional (1a, 31a, 31b, 31d, 87a) y que ha contribuido al esclarecimiento de un problema importante de interés mundial, como es el conocer las moléculas de la célula que los rotavirus utilizan para infectar. Así, el trabajo se enmarca como investigación de punta y permite consolidar la investigación en virus humanos y apoyar la realización de trabajos de tesis de la Maestría en Bioquímica de la Facultad de Medicina y sentar las bases para el desarrollo de estudios de Doctorado, en un futuro.