Abstract: Giardia lamblia es un parásito protozoo intestinal causante de la giardiasis, una patología con alta prevalencia en Latinoamérica, Asia y África que conduce a una absorción deficiente de nutrientes en el intestino, pérdida severa de electrolitos y retraso en el crecimiento. Además de su importancia clínica, este parásito es de especial interés biológico por su posición evolutiva basal y metabolismo simplificado, el cual ha sido poco estudiado. Una de las rutas metabólicas más importantes y conservadas es la biosíntesis del dinucleótido de adenina y nicotinamida (NAD). Esta molécula es ampliamente conocida como coenzima en múltiples reacciones redox y como sustrato en la síntesis de agentes movilizadores de Ca2+, en procesos de reparación del ADN y en la regulación de la expresión génica, etc. Dada la importancia del NAD a nivel celular, existen varias rutas para su biosíntesis, las cuales convergen en el paso catalizado por la enzima nicotinamida/nicotinato mononucleotido adenililtransferasa (NMNAT, EC 2.7.7.1/18). Nuestro grupo de investigación, enfocado en el estudio del metabolismo energético de parásitos de impacto médico, ha encontrado mediante herramientas bioinformáticas una nueva NMNAT en Giardia lamblia, cuya identidad se verifico inicialmente in silico. Posteriormente, la región codificante se amplificó mediante PCR y se clonó en un vector de expresión. La proteína recombinante expresada (His-GlNMNAT) se purifico mediante unión por afinidad a niquel y se utilizó para la ejecución de ensayos enzimáticos directos in vitro evaluados mediante HPLC en fase reversa, verificándose la actividad de adenililtransferasa utilizando los mononucleótidos de nicotinamida (NMN) y ácido nicotínico (NAMN) como sustratos. Este trabajo representa un avance importante en el estudio del metabolismo del NAD en Giardia sp.-- |