El Dinucleótido de Adenina y Nicotinamida/Nicotinato (NAD+/NaAD+), desempeña funciones esenciales en el metabolismo celular y en la producción energética dadas sus propiedades redox. El NAD+ participa en diversos procesos celulares tales como muerte celular, movilización de calcio, control del ciclo circadiano y control del envejecimiento, entre otros. La enzima Nicotinamida/Nicotinato Mononucleótido Adenilil Transferasa (NMNAT, EC 2.7.7.1/18), cataliza el paso clave en la biosíntesis del NAD+. Nuestro grupo de investigación ha realizado la identificación, clonación, purificación y caracterización enzimática de la NMNAT de Leishmania braziliensis (LbNMNAT), agente patogénico de importancia epidemiológica en américa latina.Con el propósito de continuar la caracterización funcional de esta enzima, en el presente trabajo se desarrollaron anticuerpos policlonales en modelos aviares (IgY). La purificación de los anticuerpos se realizó a partir de la sangre y de la yema de huevos de gallinas (Gallus gallus) inmunizadas con la proteína recombinante His-LbNMNAT, empleando métodos estandarizados previamente. Los anticuerpos obtenidos se caracterizaron mediante ELISA, Dot-blot y Western blot, utilizando la proteína recombinante His-LbNMNAT como antígeno. Con el objetivo de detectar la NMNAT endógena del parásito, se realizaron ensayos cruzados de inmunodetección sobre extractos completos de parásitos del género Leishmania. Finalmente, se realizó una aproximación a la localización intracelular de la proteína LbNMNAT mediante microscopía de fluorescencia indirecta.
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