El uso de insecticidas químicos tiene efectos negativos en la salud humana y en el bienestar del medio ambiente. Por ello es importante la búsqueda de nuevos plaguicidas que tengan menos impactos nocivos. Por esta razón el uso de cultivos in vitro del árbol de Neem (Azadirachta indica) emerge como una alternativa de interés para producir compuestos con actividad insecticida. La baja productividad de los metabolitos de interés usando un sistema de cultivo in vitro de células vegetales restringe las aplicaciones comerciales de estas técnicas. Una de las posibles causas de esta baja productividad puede ser las condiciones de estrés que se puedan presentar en la operación de estos métodos de cultivo. Sin embargo existen reportes donde la producción de algunos compuestos de interés comercial se ve aumentada cuando se establecen condiciones de cultivo estresantes, ya que algunos de estos metabolitos pueden cumplir funciones protectoras en la célula. Las células presentan un mecanismo generalizado de respuesta ante el estrés y se ha visto que la síntesis de especies reactivas de oxígeno (EROS) está relacionada con dicho mecanismo. Se ha encontrado que la respuesta antes el estrés hidrodinámico está particularmente asociada a la respuesta que presentan las células ante el estrés oxidativo. El presente trabajo busca determinar las respuestas del cultivo in vitro de A. indica frente a condiciones de estrés hidrodinámico y por oferta de oxígeno, correlacionando esas condiciones de operación con el crecimiento celular, producción de metabolitos con propiedades insecticidas, producción de especies reactivas de oxígeno (EROS) como indicadores del estrés y la actividad enzimática asociada a estos últimos. Para ello se realizarán experimentos a nivel de matraz erlenmeyer y biorreactor de tanque agitado, en distintas condiciones de operación. Se cuantificará la peroxidación lipídica como producción de malonaldehído mediante el ensayo del ácido tiobarbitúrico; se medirá la actividad enzimática de la guayacol peroxidasa mediante un método colorimétrico basado en la deshidrogenación del guayacol. La cuantificación de compuestos insecticidas se hará mediante HPLC; y el crecimiento celular será determinado mediante el peso seco. Se espera obtener una correlación entre las condiciones de operación evaluadas y el crecimiento celular, la producción de compuestos insecticidas, especies reactivas de oxígeno y actividad enzimática antioxidativa. Esto permitirá determinar el grado de sensibilidad que tienen estas células ante el tipo de estrés estudiado y poder así establecer unas condiciones de operación que favorezcan la producción en un biorreactor a mayor escala.