ANTECEDENTES: El cáncer de mama es una enfermedad de gran impacto a nivel mundial que ha aumentado su prevalencia en los últimos años, sobre todo en mujeres mayores de 50 años. En Colombia el cáncer de mama es la causa de un importante número de muertes y además un alto porcentaje del total de pacientes con cáncer en nuestro país (10.6% al año 2010). La mayoría de los pacientes con cáncer son tratados con quimio-radioterapia en alguna etapa de su enfermedad. Aunque la quimio-radioterapia pueden inducir linfopenia transitoria y otros cambios sistémicos, agentes como la Doxorrubicina (una antraciclina) y la radioterapia inducen muerte celular inmunogénica (MCI) que favorecen la infiltración del tumor por Linfocitos T-CD8+ (LT-CD8+) anti-tumorales. La eficacia de la infiltración por LT-CD8+ anti-tumorales en la erradicación de los tumores inducida por regímenes de quimio-radioterapia frecuentemente utilizados en pacientes con cáncer ha sido evidenciada ampliamente en modelos tumorales murinos y comienza a ser sustentada por datos clínicos en pacientes. La MCI es un tipo de apoptosis que genera inflamación y la eficiente activación del sistema inmune. Gran parte de las bases moleculares de la MCI han sido delineadas por numerosos estudios de los grupos de Zitvogel y Kroemer. Colectivamente, estos estudios indican que la MCI se caracteriza por: (i) la exposición pericelular de calreticulina (CRT, una chaperona intracelular), la cual favorece la fagocitosis de estas células tumorales en MCI por células dendríticas (DCs) - células presentadoras del antígeno profesionales -, (ii) la liberación de ATP y (iii) la liberación de la nucleoproteína HMGB1 por el tumor que inducen la eficiente activación de DC mediante la unión de HMBG-1 al receptor TLR-4 y del ATP al receptor P2RX7. Una vez activadas las DCs migran a ganglios linfáticos llevando restos del tumor que son presentados a LT-CD8+ antitumorales lo que conlleva a un aumento de la infiltración del tumor por estos linfocitos aproximadamente 7 días después de haber sido administrada la terapia. Por todo lo anterior se considera hoy en día que la disminución del número de células tumorales observado con la quimio-radioterapia además de su efecto cito patico directo se debe en buena medida la eficiente activación del sistema inmune por estos tratamientos RACIONAL: El uso de líneas tumorales como fuente de antígeno es una importante alternativa para la inmunoterapia del cancer. Nosotros consideramos que líneas celulares en las que se logre inducir MCI podrían ser útiles como vacuna contra ciertos tipos de cáncer. Por lo anterior en este trabajo utilizaremos una línea tumoral de cáncer de mama que expresa altos niveles del oncogén HER-2/neu (una proteína cuya expresión por tumores de mama es de mal pronóstico), la cual será sometida a distintos tratamientos de quimio-radioterapia in vitro con el fin de lograr MCI. METODLOGIA: La línea tumoral CRL2338 (HER-2/neu+++) será cultivada con diferentes dosis de agentes quimio-terapéuticos (Antraciclinas y Taxanos) y de radiación ionizante (gama, UV) por diferentes tiempos, luego de lo cual la MCI será determinada midiendo mediante citometría de flujo la exposición de fosfatidil serina (Anexina V+ = apoptosis); permeabilidad de membrana Ioduro de Propidio+ = necrosis); CRT en la membrana y translocación al citoplasma de HMGB1 y por ELISA la liberación de ATP.