El Queso doble crema es producido de manera artesanal en Colombia, y pertenece a la categoría de los de pasta hilada. En su elaboración se mezclan leche de vaca fresca y acidificada. Este proceso de acidificación tiene como finalidad el desarrollo de la microbiota láctica nativa que le trasmitirá las características organolépticas, fisicoquímicas y microbiológicas al producto elaborado. Uno de los representantes más importantes de la microbiota láctica nativa son las bacterias acido lácticas (BAL), estas favorecen la formación de sabores, aromas y texturas, propias del producto final(4-7), como lo demuestran numerosos estudios en diferentes tipos de quesos, donde hacen referencia al papel fundamental de las BAL, en los procesos de acidificación y de actividad proteolítica que intervienen en el desarrollo de las características organolépticas. Actualmente, la industria quesera presenta gran variedad de quesos autóctonos como el Queso Doble Crema, que deben ser conservados y promovidos como parte de nuestro patrimonio cultural. La especificidad de los alimentos tradicionales procede, de la incorporación de valores patrimoniales producidos en los territorios. Esos valores poseen atributos de bienes colectivos; no tienen valor mercantil propio pero generan valor agregado y son objetos de tensiones y rivalidades. Sólo pueden preservarse y valorarse en la medida en que llegan a ser previamente reconocidos y especificados, apropiados y administrados. Dentro de las métodos para identificación de la microbiota láctica nativa, específicamente de las Bacterias Acido Lacticas, sobresalen las técnicas moleculares dependientes e independientes de cultivo, el RFLP, la ribotipificación, el AFLP, el ARDRA y el RAPD., Análisis PCR-DGGE, DGGE o TGGE, que favorecen el estudio de diferentes organismos que no son fáciles de obtener con los procedimientos tradicionales basados en medios de cultivos (27-28). Estas técnicas sean utilizado para la caracterización de la microbiota de quesos como: Queso Percorino Sardo, quesos flamencos artesanales tipo Gouda, queso Parmigiano Reggiano entre otros, que son quesos artesanales que han sido protegidos con Denominación de Origen. El objetivo de este trabajo es determinar la diversidad de Bacterias Acido Lácticas (BAL) presentes en quesos producidos artesanalmente: Queso Doble Crema; utilizando métodos moleculares dependientes e independiente de cultivo. Para el logro de este objetivo se plantea obtener Quesos Doble Crema, de las industrias queseras representativas de la región de Ubate, del altiplano cundiboyacense, zona reconocida por su producción de Queso Doble Crema. La identificación de BAL se realizara mediante aislamientos en medios selectivos y agar nutritivo en condiciones de aerobiosis y anaerobiosis, a los cuales se someterán a extracción de DNA total, Amplificación del gen ribosomal 16S rDNA, análisis de electroforesis en geles de poliacrilamida en gradiente desnaturalizante (DGGE), secuenciación y análisis filogenético. Paralelamente se realizara extracción del DNA total y análisis por PCR-DGGE, para la búsqueda de Bacterias no cultivables, las cuales serán secuenciadas y comparadas por los métodos dependientes de cultivos. Este trabajo permitirá obtener un conocimiento más a fondo de las Baterias Acido Lácticas en el proceso de producción del Queso Doble Crema y cimentar las bases, de la caracterización de la microbiota presente con miras a buscar una Denominación de Origen para este queso.