Los hongos son un grupo diverso de organismos bien diferenciados que incluye especies con carpóforos grandes y visibles conocidos con el nombre de macromicetos. Las aplicaciones biotecnológicas de los hongos están relacionadas con la capacidad que tienen estos organismos de producir en sus células compuestos químicos, farmacéuticos y enzimas, razón por la cual se les ha denominado “biofábricas”. El hongo Pleurotus albidus(Berk)Pegler, es un macromiceto silvestre recolectado en un bosque de la ciudad de Manizales, Caldas. Es el primer registro taxonómico de Pleurotus albidus para Colombia. El objetivo del presente estudio es cuantificar por cromatografía líquida de alta eficiencia (HPLC), el contenido de cafeína y ergosterol en el cuerpo fructífero del hongo Pleurotus albidus(Berk)Pegler. La cuantificación de cafeína permitirá establecer la cantidad de cafeína incorporada por el hongo Pleurotus albidus (Berk) Pegler, durante su crecimiento sobre pulpa de café. Lo anterior, contribuirá a evaluar posibilidades de reciclaje y aprovechamiento de la pulpa de café en el cultivo de hongos comestibles. Ergosterol es el principal esterol presente en las membranas de las células de los hongos. Es el precursor de vitamina D2 y también se utiliza en la producción de cortisona y la hormona progesterona. La cuantificación de ergosterol ayudará a establecer el potencial biotecnológico del hongo Pleurotus albidus (Berk) Pegler, para la producción industrial de ergosterol.