Este proyecto se presenta como la continuación de un trabajo que permitió la identificación, expresión y purificación de la PfNMNAT (E.C. 2.7.7.1), en el cual se obtuvieron bajos niveles de proteína nativa debido a la formación de cuerpos de inclusión, lo que dificultó la caracterización de esta. En esta propuesta se busca optimizar la expresión y purificación de la PfNMNAT con el objeto de incrementar la presencia de la proteína recombinante nativa; mediante el uso de diferentes cepas de expresión en E. coli. La purificación se llevará acabo mediante cromatografia de afinidad, evaluando los resultados mediante geles de SDS-PAGE y Western Blot.
A partir de la proteína recombinante purificada, se estandardizará un ensayo de actividad enzimática por HPLC, que permita determinar los parámetros cinéticos de la enzima.
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