La tuberculosis (TB) es una enfermedad infecciosa causada por por el bacilo ácido alcohol resistente Mycobacterium tuberculosis (Mtb), y continúa siendo un reto para la salud pública debido a su alta incidencia, la aparición de cepas de Mtb multi-fármacorresistentes (MDR) y extremadamente- fármacoresistentes (XDR), la coinfección TB/VIH y la eficacia limitada de la única vacuna aprobada contra esta enfermedad, la vacuna Bacillus Calmatte-Guérin (BCG). Por lo tanto, es primordial una mayor comprensión de los mecanismos moleculares utilizados por Mtb para ser un patógeno intracelular tan exitoso. En este sentido, estudios previos han demostrado la importancia de las proteínas de membrana debido a su papel como transportadores y mediadores en la interacción de Mtb y la célula hospedera. En este sentido, algunos estudios han demostrado que ciertos transportadores transmembranales desempeñan funciones requeridas para la proliferación y virulencia de Mtb, entre ellos, las ATPasas Tipo P. Estas bombas se encargan del transporte activo de cationes, manteniendo una adecuada homeostasis iónica celular y generando los gradientes electroquímicos apropiados para la supervivencia de Mtb. De las 12 ATPasas tipo P de Mtb, se destaca CtpH una Ca2+-ATPasa cuya expresión aumenta durante los procesos de infección in vitro, sugiriendo la importancia de esta ATPasa para la virulencia de Mtb. En un trabajo previó realizado en nuestro grupo de investigación “Bioquímica y Biología Molecular de las Micobacterias (BBMM)”, se demostró que la cepa mutante en el gen ctpH de Mtb disminuye la capacidad del bacilo tuberculoso para enfrentar concentraciones tóxicas de Ca2+ y Na+, así como la presencia de especies generadoras de estrés oxidativo y nitrosativo. Además, se determinó mediante análisis de expresión génica que ctpH sería fundamental para respaldar o compensar la actividad de otras Ca2+-ATPasas de Mtb. Por lo tanto, en el presente proyecto se realizará la complementación de la cepa Mtb defectiva en el gen ctpH de Mtb empleando un sistema de integración sitio específica con el fin de evaluar la recuperación del fenotipo silvestre y confirmar el papel de CtpH para la homeostasis iónica del bacilo.