Proyectos
ESTANDARIZACIÓN DE LA OBTENCIÓN Y PRESERVACIÓN DE CÉLULAS TUMORALES Y ANALISIS DEL INFILTRADO TUMORAL CON FINES DE MEDICINA TRASLACIONAL EN EL HOSPITAL UNIVERSITARIO NACIONAL
Resumen
El cáncer resulta de la acumulación de mutaciones en la progenie de la célula que favorece el crecimiento selectivo de células que pierden el control del ciclo celular y adquieren mecanismos de evasión de la respuesta inmune favorecido por el microambiente tumoral [1]. El microambiente tumoral bloquea el sistema inmune, esto ha sido comprobado en estudios que demuestran que la contextura tumoral es factor pronóstico de la enfermedad en pacientes con cáncer [2]. De la contextura del tumor hacen parte además de células neoplásicas, células estromales, neovasculatura y células del sistema inmune. Estudios como los de West et al en 2011, describen en pacientes con cáncer de mama una correlación entre características del infiltrado tumoral y respuesta clínica favorable al tratamiento [3]. Tomando cáncer colo-rectal como modelo, Bindea y col., acuñaron el concepto de “paisaje inmune” en cáncer. El análisis de la composición del infiltrado inflamatorio y el inmouno-fenotipo de las células inmunes dentro del tumor permitió establecer un “inmunoscore” (puntuación cuantitativa/cualitativa del infiltrado inmune en el tumor), con valor predictivo superior al TNM [4]. De la misma manera otros estudios señalan que la relación entre: linfocitos T (LT) CD8+, CD4+ Foliculares (CD45RO+), NK CD57+, Linfocitos B vs. células supresoras (mieloides y linfocitos T supresores (FoxP3+)) presentes en el tumor; la presencia de células dendríticas y macrófagos y el nivel de expresión de marcadores de activación o supresión en estas células, determinan de manera importante la respuesta del tumor al tratamiento y la sobrevida de los pacientes [5]. Por lo anterior la cuantificación y análisis del inmuno-fenotipo de células del sistema inmune que infiltran el tumor contribuye a determinar el pronóstico y respuesta clínica en el paciente con cáncer [4]. Por otra parte, la disponibilidad de células tumorales viables brinda hoy en día a los pacientes una variedad de posibilidades de tratamientos de inmuno-terapia como vacunas terapéuticas autólogas; identificación de antígenos propios del tumor y clonación de linfocitos T infiltrantes de tumor para transferencia adoptiva y análisis génico del tumor entre otros análisis. No obstante todo lo anterior, en nuestro medio los tumores en general son desechados luego de cirugía con lo cual se priva al paciente no solo de un valioso instrumento para monitorear mejor la evolución de su enfermedad sino de un importante recurso adicional para su tratamiento. Este proyecto que se desarrollará en colaboración con los grupos de Patología Molecular de la Facultad de Medicina de la Universidad Nacional y de Gastroenterología del Hospital del Tunal, persigue generar un protocolo para la obtención y preservación de células viables de tumores sólidos (cáncer gástrico como piloto) con fines de implementar un bio-banco de tumores en el HUN. Para ello, 10 especímenes frescos de cáncer gástrico serán procesados por IHQ y con colagenasa en el laboratorio con el fin de obtener una suspensión de células tumorales viables las cuales serán crio-preservadas en nitrógeno líquido. La calidad de las células ex vivo será comparada con las células luego de su descongelación analizando el rendimiento, la viabilidad y el inmuoscore del infiltrado tumoral. El immunoscore será establecido mediante citometría de flujo multiparamétrica con dos paneles cada uno de 10 anticuerpos fluoro-marcados ya estandarizados en el laboratorio en muestras de sangre ex vivo, que nos permite cuantificar y analizar el fenotipo de: (i) LT CD4+ y CD8+ y foliculares vírgenes y de memoria; (ii) Macrófagos; (iii) células dendríticas mieloides y (iv) plasmacitoides; (v) LT y (vi) macrófagos supresores (ver anexos 1 y 2) y la expresión de receptores inhibidores en linfocitos T (ver anexo 3).
Convocatoria
Nombre de la convocatoria:CONVOCATORIA DE INVESTIGACIÓN TRASLACIONAL FACULTAD DE MEDICINA 2016
Modalidad:MODALIDAD 2. PROYECTOS DE INVESTIGACIÓN QUE INVOLUCREN MÁS DE DOS GRUPOS DE INVESTIGACIÓN QUE INCLUYAN MÍNIMO DOS DE LAS ÁREAS MENCIONADAS Y QUE SU PROYECTO TENGA DESARROLLOS APLICADOS AL FUNCIONAMIENTO DEL HOSPITAL UNIVERSITARIO, COMO SON TEMAS RELACIONADOS CON SEGURIDAD DEL PACIENTES, ENTRE OTROS.
Responsable