Problema: La leucemia linfoide aguda (LLA) pediátrica es un grave problema de salud pública en nuestro país y en el mundo. Es la neoplasia más frecuente en la niñez, con una incidencia anual de 3-4 casos por cada 100000 niños menores de 15 años y es la segunda causa de muerte en este período de la vida. Para su diagnóstico y seguimiento se requiere de la realización de un aspirado de médula ósea. En el momento se requiere del descubrimiento de biomarcadores que ayuden a mejorar el control de esta enfermedad. El descubrimiento de potenciales biomarcadores en suero ofrecería la posibilidad de contribuir al diagnóstico y pronóstico de esta enfermedad de una manera mínimamente invasiva.
Objetivos:
Objetivo General: Detectar e identificar de manera preliminar proteínas ausentes o presentes diferencialmente expresadas en proteomas plasmáticos de un grupo de niños con LLA pre-B y común y un grupo de controles sanos.
Objetivos Específicos:
1. Obtener el proteoma plasmático de un grupo de niños con LLA pre-B y común y un grupo de controles sanos mediante electroforesis en dos dimensiones.
2. Detectar proteínas ausentes o presentes de manera diferencial en el proteoma plasmático de ambos grupos mediante análisis bioinformático de los geles en dos dimensiones.
3. Identificar de manera preliminar las proteínas diferencialmente expresadas por medio de espectrometría de masas en tandem MALDI-TOF/TOF.
Materiales y métodos: Estudio exploratorio de tipo observacional en el que se obtendrán los proteomas séricos de una muestra de doce niños , entre 1 y 10 años, con LLA pre-B y doce niños sanos en el mismo rango de edad, tomados de las muestras contempladas en el proyecto Estudio exploratorio de potenciales biomarcadores de Leucemia Linfoide Aguda pre-B en Colombia" empleando técnicas de electroforesis de proteínas en dos dimensiones (2-DE). Posteriormente se identificarán proteínas ausentes o presentes de manera diferencial en ambos grupos mediante comparación de spots de los geles empleando herramientas bioinformáticas (software PDQuest). Los spots seleccionados se extraerán del gel, para realización de espectrometría de masas en tandem(MALDI-TOF/TOF) en el laboratorio del Instituto FIOCRUZ, en Rio de Janeiro, Brasil, lo cual dará una identificación preliminar de las proteínas de expresión diferencial en niños con LLA pre-B y controles. En una fase posterior al año de realización de este proyecto, se realizarán los análisis bioinformáticos que permitirán la organización, validación e interpretación de estos resultados para identificar definitivamente las proteínas diferencialmente expresadas (ausencia o presencia) en ambos grupos.
Impacto esperado: A corto plazo: Generación de conocimiento sobre LLA pre-B y común, evidenciable por la publicación de 1 artículo en revista indexada, contribución a la formación académica de un estudiante de pregrado y avance en el desarrollo de tesis de un estudiante de postgrado. Fortalecimiento de la cooperación internacional entre los grupos de investigación en Hormonas de la Universidad Nacional de Colombia y Leishmaniasis del Instituto Oswaldo Cruz en Brasil. A mediano plazo: Contribución a la identificación de proteínas con potencial como biomarcadores de LLA, fortalecimiento de la línea de biomarcadores en cáncer del Grupo de Investigación en Hormonas. |