Proyectos
--Efecto de la Relaxina en la viabilidad y proliferación de osteoblastos y en la diferenciación de células mesenquimales de pulpa dental humana in vitro.
Resumen
Muchas investigaciones se han enfocado en agentes que estimulen el metabolismo óseo tal como la hormona paratiroidea, estrógenos y bifosfonatos, con el fin de acercarse a mejores sistemas de fuerza que logren el movimiento dental óptimo, Debido a que la estimulación osteogénica es importante para acelerar la producción ósea y la mineralización de la matriz, varios procesos pueden ser modulados mediante estímulos, como la aplicación de vitamina D, prostaglandinas, bifosfonatos y hormonas dentro de las que se encuentra la relaxina. La relaxina (RLN) es una hormona similar a la insulina que, inicialmente, fue descrita como un factor que facilita el parto; sin embargo, también está asociada con la formación de colágeno, antifibrosis, angiogénesis y metástasis tumorales. Debido a su amplio rango de actividades, se vienen realizando varios estudios in vivo e in vitro, para determinar su utilidad clínica en el tratamiento de patologías como la fibrosis y para modular el movimiento dental ortodóntico, aunque su papel en este último aun es poco entendido y controversial. Adicionalmente, algunos estudios han determinado que los receptores de la RLN no solo se encuentran ubicados en los tejidos reproductivos, sino también en células del tejido óseo como osteoclastos, osteoblastos y osteocitos. Por lo tanto, se ha determinado que la RLN está implicada en la diferenciación de monocitos y en la sobrevivencia y activación de los osteoclastos. Por otra parte, es poco lo que se conoce sobre el efecto de la RLN en la diferenciación de células madre mesenquimales (MSC) en osteoblastos y de su participación en la formación y mineralización ósea. Las células MSC son células madre pluripotencial clonogénicas y autorrenovables que pueden generar una o más tipos de células especializadas como osteocitos, adipocitos y condrocitos. Se ha aceptado la terapia basada en MSCs como un recurso prometedor para el tratamiento clínico en el área de la medicina regenerativa, especialmente en la reparación y regeneración de tejido óseo. Estas células se han aislado de muchos órganos y tejidos que incluyen medula ósea, corazón, sangre, intestino, tejido adiposo, hígado, páncreas y actualmente de dientes. Por esta razón, el objetivo de este trabajo de investigación es determinar el efecto de la relaxina en la viabilidad y proliferación de osteoblastos y en la diferenciación de células mesenquimales de pulpa dental humana in vitro. El tipo de estudio que se realizará en este proyecto es experimental cuantitativo in vitro. Se utilizarán dos tipos de células: células madre de pulpa dental (hDPSC) obtenidas previamente de premolares de pacientes sometidos a tratamiento ortodóntico y la línea celular de osteoblastos 7F2 (ATCC CRL-12557). Estas células serán sometidas a medio de cultivo de inducción osteogénica y RLN. Así mismo, la viabilidad y proliferación celular de las células DPSC y osteoblastos con o sin tratamiento con RLN, se evaluarán por las técnicas de exclusión de tripán blue y por la prueba fluorométrica de resazurina. Por otro lado, para confirmar la diferenciación de las células mesenquimales a osteoblastos se evaluará la expresión del gen RUNX2, el cual constituye la primera evidencia de la diferenciación osteogénica y cuyo máximo nivel se alcanza en los preosteoblastos y la formación de nódulos de calcificación por tinción con rojo de alizarina. Los resultados y las conclusiones que se obtengan de este estudio serán útiles para la ampliación del conocimiento que se tiene sobre el efecto de RLN en el metabolismo óseo, específicamente en la diferenciación de células mesenquimales hacia osteoblastos y su efecto sobre la viabilidad, proliferación y estimulación de osteoblastos activos. También permitirá conocer diferentes moléculas estimuladoras que actúan en las células madre, aprovechando su gran potencial de diferenciación, lo que pueden permitir en un futuro su aplicación en incontables necesidades clínicas.
Convocatoria
Nombre de la convocatoria:CONVOCATORIA ESTÍMULO A LA INVESTIGACIÓN FACULTAD DE ODONTOLOGÍA 2020
Modalidad:Modalidad Única: Apoyo a proyectos de investigación dirigidos por docentes investigadores de la Facultad de Odontología vinculados a grupos de investigación activos en el Sistema de Información Hermes.
Responsable