Proyectos
--GENOTIPIFICACIÓN DE VHS-2 AISLADO DE 4 PACIENTES RECEPTORES DE TRASPLANTE DE PRECURSORES HEMATOPOYÉTICOS
Resumen
La familia herpesviridae está constituida por virus DNA de doble cadena, 8 de los cuales infectan humanos, estos se subdividen en 3 subfamilias: alfa herpesvirinae, beta herpesvirinae y gamma herpesvirinae. Los alfa herpesvirinae son: Virus Herpes Simple 1 (VHS-1), Virus Herpes Simple 2 (VHS-2) y Varicella Zoster Virus (VZV). Estos virus son epitelio y neurotrópicos, tienen un ciclo replicativo rápido y establecen latencia en ganglios nerviosos. A partir de esta infección latente se pueden producir reactivaciones con replicación viral que puede ser sintomática o asintomática. El genoma de VHS está constituido por dos grandes regiones o segmentos: UL (Unique Long) y US (Unique Short); estas se encuentran flanqueadas por regiones invertidas repetidas. Las variaciones genéticas que se producen durante la replicación viral pueden llevar al surgimiento de cepas con resistencia a los antivirales o más asociados a producción de enfermedad. Puede tratarse simplemente de mutaciones puntuales, deleciones o inserciones hasta recombinación genética; se ha reportado la existencia de cepas distintas de VHS-2 según localización geográfica y entre pacientes VIH positivos y VIH negativos. La genotipificación para VHS-2 se ha estudiado en el contexto de las infecciones genitales recurrentes y la asociación con la transmisión de VIH-1. Se ha descrito la relación de diferentes genotipos de VHS-2 con un mayor número de recurrencias de herpes genital. VHS se transmite por contacto próximo con individuos que tienen lesiones evidentes clínicamente y por la descarga viral asintomática; esta consiste en la presencia de viriones en secreciones de individuos asintomáticos. La descarga puede ser una vía muy importante de transmisión por lo que se ha evaluado en orina, secreciones genitales y en saliva. Actualmente es claro que tanto VHS-1 como VHS-2 son responsables de lesiones orales y genitales. Esto implica que VHS-2 se puede transmitir por la saliva. El trasplante de precursores hematopoyéticos en pacientes pediátricos es una alternativa de tratamiento definitivo para condiciones neoplásicas, metabólicas y hereditarias. El paciente se somete a un régimen de preparación con agentes quimioterapéuticos e inmunosupresores que lo predisponen a infecciones oportunistas. VHS-1 y 2 también pueden sufrir reactivación de infecciones latentes y llegar a producir lesiones principalmente en cavidad oral, pero también es posible la ocurrencia de complicaciones como encefalitis o neumonitis. Dada la inmunosupresión severa que sufren los pacientes trasplantados y la importancia de la respuesta inmunológica en el control de la replicación viral, se decidió evaluar la descarga viral asintomática en la saliva de los pacientes pediátricos de la unidad de trasplante de precursores hematopoyéticos de la fundación hospital de la misericordia para detectar el ADN de VHS-1 y VHS-2 por PCR convencional. De 17 pacientes evaluados se detectó ADN de VHS-2 en 4 pacientes. No se detectó ADN de VHS-1. Los pacientes con resultados positivos para VHS-2 fueron dos niños y dos niñas que se encontraban en un rango de edad de 7 a 16 años; a partir de las muestras positivas para ADN de VHS-2 se pretende llevar a cabo la genotipificación de VHS-2. Objetivo: Genotipificar VHS-2 a partir de las muestras de saliva positivas, obtenidas de pacientes de la unidad de trasplante de precursores hematopoyéticos de la fundación hospital de la misericordia. A partir de ADN de VHS-2 congelado a -80°C se llevará a cabo la genotipificación. Se verificará la calidad del ADN llevando a cabo una PCR convencional y electroforesis en gel de agarosa. Se obtendrán primers forward y reverse de los genes US1 y US4 para llevar a cabo la genotipificación por PCR anidada. Según la literatura revisada los genes US1 Y US4 son buenos candidatos para determinar la variación genética entre los aislados de los pacientes trasplantados. Se espera encontrar variantes del VHS-2 aislado.
Convocatoria
Nombre de la convocatoria:PROGRAMA NACIONAL DE SEMILLEROS DE INVESTIGACIÓN, CREACIÓN E INNOVACIÓN DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA 2013-2015
Modalidad:Modalidad 1: Proyectos para la introducción en la investigación, creación o innovación
Responsable