A la búsqueda de un eventual blanco terapéutico para evitar los efectos nocivos del estrés sobre la memoria, este proyecto estudiará cómo la inhibición de las desacetilasas de histonas modifica los efectos del estrés agudo sobre la memoria espacial usando ratas Wistas macho adultas. Para ello, se propone un diseño experimental de tipo factorial con tres variables independientes: 1. Estrés agudo por 1 hora de restricción motora, 2. Entrenamiento espacial en el laberinto de Barnes, y 3. Inhibición sistémica de las histonas desacetilasas administrando Trichostatin A. Los efectos de estas variables se evaluarán cuantificando en el hipocampo, amígdala, corteza pre-límbica y el núcleo paraventricular del hipotálamo: A. El nivel relativo de acetilación de las histonas mediante la técnica de inmunohistoquímica, B. La expresión de RNA mensajero para las sub-unidades alfa1 y alfa2 del receptor GABA-A y NR1, NR2A y NR2B del receptor usando la técnica de PCR cuantitativo, C. El nivel de expresión de las sub-unidades antes mencionadas, así como su co-localización con proteínas de densidades post-sinápticas (Gefirina y PSD-95) usando la técnica de co-inmunohistoquímica. D. El nivel de asociación entre la histona 3 acetilada con los promotores de los genes codificantes para subunidades de los receptores antes mencionados, utilizando un ensayo de inmunoprecipitación de cromatina seguida de PCR semi-cuantitativa. Además, se evaluará el nivel de corticosterona plasmática mediante un ensayo ELISA en todos los animales 24 horas después de los tratamientos experimentales. Para los animales de los grupos experimentales que tengan entrenamiento en el laberinto de Barnes se evaluará su desempeño en una prueba de memoria 24 horas después del entrenamiento.
Esta investigación afronta simultáneamente las bases biológicas de los efectos nocivos del estrés sobre el sistema nervioso y las bases neurobiológicas de un procesos cognoscitivo. Por ende, los resultados de esta investigación permitirán tener una mejor comprensión de las interacciones moleculares desencadenadas por el estrés, la formación de la memoria y los efectos de la inhibición de las desacetilasas de histonas en el sistema nervioso central. |