La infraestructura de la calidad es un motor para el desarrollo productivo en las economías globales, y uno de los principales factores para que las pequeñas y medianas empresas colombianas puedan acceder a oportunidades de mercado en el comercio internacional. A través de la oferta ampliada de bienes públicos y servicios, incluidos productos metrológicos, la infraestructura nacional de la calidad contribuye definitivamente al desarrollo y mejora de nuevos productos, además de la competitividad y productividad de bienes y servicios. La industria ganadera de Colombia debe seguir lineamientos técnicos de producción que aseguren la inocuidad de los productos destinados a comercialización, como estrategia de mejora de la competitividad. Para superar los desafíos presentes en el sector ganadero y fortalecer las capacidades de gestión de riesgos sanitarios, fitosanitarios y de inocuidad de los alimentos; los métodos diagnósticos juegan un papel crítico como una de las primeras medidas de bioseguridad, y de esta manera mejorar la productividad y inocuidad alimentaria nacional. En Colombia, los métodos autorizados para el diagnóstico de enfermedades zoonóticas de control oficial como la brucelosis y tuberculosis (TB) bovina, están basados en el cultivo bacteriológico, la tipificación, serología, pruebas inmunoquímicas y en menor medida en la reacción en cadena de la polimerasa (PCR). Estos métodos en ocasiones emplean protocolos carentes de suficiente sensibilidad o rapidez para ser ejecutados cerca o en los centros de producción, lo que obliga al traslado de las muestras clínicas al laboratorio, implicando así mayores tiempos de análisis, posibilidad de contaminación, costos y disminución de la capacidad de cobertura. Por otra parte, las pruebas basadas en la PCR requieren de una infraestructura especializada en términos del personal, equipos, condiciones de laboratorio, limitando su aplicación en pequeños laboratorios. En consistencia dichas pruebas requieren de referencias específicas para las dianas de interés, no disponibles actualmente, que garanticen la reproducibilidad de los resultados de medición especialmente y conlleven a la operativización de los métodos. La disponibilidad de métodos diagnósticos más sensibles y específicos contribuiría definitivamente a mejorar el diagnóstico y la presencia de este tipo patógenos zoonóticos en cualquier etapa, previniendo así su diseminación en el ámbito agropecuario, con su respectivo efecto en la productividad e inocuidad sanitaria. En este sentido, el uso de métodos basados en PCR isotérmica presentan la ventaja de ser rápidos, específicos, sensibles, con facilidad de automatización y no necesita los requerimientos técnicos exigentes de la PCR convencional, haciéndola posible ser aplicados en el sitio o llevados cerca de los pequeños y medianos centros de producción. Por lo tanto, el presente proyecto tiene como objetivo fortalecer las capacidades nacionales de detección y diagnóstico de M. bovis y B. abortus a través del desarrollo de herramientas de aseguramiento metrológico, por medio de métodos moleculares de detección rápida vía PCR isotérmica y materiales de referencia, que permitan ampliar el conjunto de herramientas diagnósticas disponibles para contribuir a la productividad y competitividad nacional en las cadenas de lácteos y carne bovina. Para alcanzar este objetivo, se propone en una primera etapa desarrollar métodos de medición por PCR en tiempo real y PCR digital para caracterizar un material de referencia a nivel de ADN genómico tanto para M. bovis como B. abortus. En una segunda etapa, con ayuda de los materiales de referencia producidos, se desarrollarán y evaluarán métodos de detección rápida de M. bovis como B. abortus empleando la amplificación isotérmica de ácidos nucleicos y se evaluarán las condiciones para ser implementada en campo para la detección en tiempo real. El desarrollo de estas herramientas se traducirá en el aumento de las capacidades diagnóstic