Proyectos
EVALUACION DEL IMPACTO DE LA INFECCIÓN DE Leishmania (Leishmania) amazonensis Y Leishmania (Viannia) braziliensis SOBRE LA APOPTOSIS EN LA LÍNEA CELULAR DE MACRÓFAGOS J774.A1.
Resumen
Leishmania spp, son parásitos intracelulares con tropismo por células dendríticas y macrófagos de humanos y otros hospederos vertebrados, que se transmiten por medio de la picadura de insectos de diferentes especies de la familia Phlebotominae. Estos parásitos producen la Leishmaniasis, una de las enfermedades que en Colombia tiene alto impacto en salud pública, presenta un rango amplio de síntomas clínicos dependientes de las interacciones entre la respuesta inmune del hospedero y la especie de Leishmania involucrada. Una estrategia adaptativa reconocida en un gran número de agentes patógenos incluyendo virus, bacterias y protozoarios para evadir la respuesta inmune del hospedero es la inhibición o retardo del proceso de muerte celular programada o apoptosis. Para Leishmania existen pocos estudios que documenten este proceso en especies del subgénero Leishmania, siendo aún más escasos los estudios en el subgénero Viannia. Teniendo en cuenta que, específicamente en Leishmania se han demostrado amplias diferencias en las manifestaciones clínicas, en relación con la especie de parásito infectante, he decidido evaluar el impacto de la infección de dos diferentes especies de este parásito (pertenecientes al subgénero Leishmania y subgénero Viannia) sobre la apoptosis de la línea celular de macrófagos J774.A1. Las especies a evaluar son Leishmania (Leishmania) amazonensis y L. (Viannia) braziliensis. Para la realización de este proyecto es necesario comenzar con la caracterización de la infección de las especies L. (L.) amazonensis y L. (V.) braziliensis en las células J774.A1 por medio de curvas de crecimiento, caracterización del tamaño de las vacuolas y porcentajes de infección. Se planea estandarizar un protocolo de apoptosis evaluando diferentes inductores como actinomicina, estaurosporina, radiación UV y ácido araquidónico. Los procesos apoptóticos se evaluarán mediante la detección de alteraciones en la fluorescencia de la cromatina por marcaje con naranja de acridina, la detección del fraccionamiento del DNA por electroforesis y finalmente la expresión de la fosfatidilserina en la hemicapa externa de la membrana. Paralelamente se está desarrollando un proyecto de investigación que busca medir si la hiperpolarización de la membrana del macrófago previene la apoptosis y favorece por tanto la supervivencia del parásito en su interior. Con estos resultados se busca establecer las diferencias en los patrones de infección en las especies de Leishmania evaluadas, y determinar si existe o no una inhibición o retardo en la inducción del proceso de apoptosis que buscarán asociarse posteriormente a los cambios en la hiperpolarización de la membrana del macrófago.
Convocatoria
Nombre de la convocatoria:CONVOCATORIA APOYO A TESIS DE PROGRAMAS DE POSGRADO - 2007
Modalidad:CONVOCATORIA APOYO A TESIS DE PROGRAMAS DE POSGRADO SEDE BOGOTÁ - 2007
Responsable