Proyectos
MODULACIÓN DE MOLECULAS DE SEÑALIZACIÓN LOCALIZADAS EN LOS MICRODOMINIOS BALSAS LIPIDICAS (RAFTS)
Resumen
Las señales que controlan el crecimiento celular se integran en los dominios de la membrana conocidos como balsas lipídicas (“lípid rafts”, en inglés). En algunos tipos de cáncer éstas señales están desreguladas, específicamente a nivel del encogen Ras, el cual se localiza precisamente en estos rafts lipídicos. No ha sido posible inhibir Ras directamente en los rafts lipídicos; se ha tenido como blanco moléculas “corriente abajo” de Ras por lo que el efecto no es completo. El presente trabajo tiene como objetivo principal modular directamente la actividad del encogen Ras y sus vías de señalización. Se busca hacerlo por medio de “péptidos permeables a células”; que son pequeñas secuencias de amino ácidos hidrofóbicos capaces de atravesar las membranas celulares y/o localizarlos en compartimentos subcelulares. Estas secuencias se han acoplado a péptidos o fármacos, por lo que éstos últimos se han podido llevar al interior celular o compartimentos subcelulares específicos. Se van a diseñar péptidos quiméricos usando bases de datos Bioinformáticas y estarán compuestos de una secuencia capaz de unirse a Ras (bloqueando su unión a proteínas efectoras) y otra que permita su localización en los rafts lipídicos. La línea celular linfoblastoide Jurkat, adquirida de la American Type Culture Collection, se incubará con los péptidos sintetizados. Por medio de ultracentrifugación se aislarán los rafts lipídicos y posteriormente, por electroforesis en geles de poliacrilamida y Western blot se determinará la presencia o no del péptido quimérico en los rafts. En experimentos de co-inmunoprecipitación se detectará la interacción entre el péptido y la proteína Ras. En células expuestas a los péptidos se estudiará por medio de electroforesis y Western Blot la inhibición de la vía de señalización de Ras determinando la fosforilación de las proteínas ERK1/2. Se consideran los aspectos éticos de la Resolución 008430 de 1993. No se incluye trabajo con muestras de pacientes; las células usadas se obtienen de líneas celulares expandidas in vitro. Los procedimientos a realizar presentan un riesgo menor al mínimo. Los investigadores que hacen parte de ésta propuestas no declaran conflictos de interés.
Convocatoria
Nombre de la convocatoria:CONVOCATORIA: "SEMILLEROS DE CREACIÓN E INVESTIGACIÓN DE LA DIB" DE LA DIRECCIÓN DE INVESTIGACIÓN DE BOGOTÁ -PRIMER CORTE
Modalidad:Modalidad 1: Apoyo a trabajos de investigación o creación en el país. PRIMER CORTE
Responsable