La tuberculosis bovina (TBB) es una enfermedad infectocontagiosa, causada en bovinos por la especie bacteriana Mycobacterium bovis (Mb). Este tipo de enfermedad puede generar altas pérdidas en el sector ganadero a nivel de la producción cárnica y lechera, motivo por el que el ICA en Colombia ha desarrollado estrategias para su prevención y control. Tradicionalmente la TBB se diagnostica mediante la prueba estándar de referencia conocida como Tuberculina, la que presenta inconvenientes de sensibilidad y especificidad. En este sentido, se hace prioritario además de las pruebas serológicas, el desarrollo de métodos métodos de diagnóstico moleculares como los basados en la PCR, toda vez que esta técnica proporciona una mayor sensibilidad, rapidez y especificidad.
Actualmente existen diferentes métodos para identificar y cuantificar M. bovis basados en la PCR, tales como qPCR, dPCR, y PCR isotérmica (LAMP). Sin embargo, desafortunadamente no existe equivalencia o comparabilidad en los resultados obtenidos con estas metodologías, toda vez que no existe en nuestro medio un material de referencia a nivel de ADN como patrón de comparación trazable al sistema internacional de unidades. Con el objetivo de contribuir a la comparabilidad y trazabilidad de las medidas realizadas por métodos basados en la amplificación de ácidos nucleicos, proponemos producir por primera vez en Colombia un candidato a material de referencia (MR) a nivel de ADN genómico de M. bovis. El material producido se caracterizará mediante qPCR y PCR digital, y se probará con una PCR LAMP, la que se propone poner a punto en el presente proyecto. El material de referencia producido se podría emplear para el control de calidad de las medidas realizadas por diferentes tipos de PCR, permitiendo establecer equivalencias entre los resultados de medición obtenidos por los distintos ensayos y garantizar la trazabilidad al sistema internacional de unidades en nuestro país. |