El parásito intracelular Trypanosoma cruzi es el agente etiológico de la enfermedad de Chagas, un problema de salud pública que registra un aumento de su tasa de incidencia. Este aumento se debe a mecanismos de resistencia a fármacos que presenta este parásito; en los cuales interviene el Dinucleótido de Adenina y Nicotinamida (NAD+). Adicionalmente esta molécula participa en procesos metabólicos y de señalización intracelular necesarios para la supervivencia de T. cruzi a lo largo de su ciclo de vida. La biosíntesis del NAD+ se realiza mediante rutas de novo y de reciclaje, que convergen en el punto catalizado por la enzima Nicotinamida Mononucleótido Adenilil Transferasa (NMNAT EC: 2.7.7.1). Identificar la NMNAT de T. cruzi, es importante para desarrollar futuras estrategias terapéuticas contra la enfermedad de Chagas. En este estudio se identificó un marco de lectura abierto (ORF) hipotético para la NMNAT en el genoma de T. cruzi. La proteína putativa correspondiente se analizó mediante la simulación de modelos estructurales, los cuales indicaron su pertenencia a la familia Nucleotidil Transferasa. El ORF se amplificó a partir de ADN genómico por PCR y se empleó para la construcción del respectivo vector recombinante de expresión. La proteína recombinante expresada, se purificó parcialmente por cromatografía de afinidad a níquel y su actividad enzimática se corroboró a través de ensayos enzimáticos directos. Estos resultados comprenden la primera Identificación de una NMNAT en Trypanosoma cruzi mediante estrategias bioinformáticas y experimentales. Siendo una primera aproximación al metabolismo del NAD+ de estos parásitos.