El parásito intracelular Leishmania braziliensis pertenece al Orden Tripanosomátida y es el agente causal de la leishmaniasis, problema de salud pública que afecta en promedio dos millones de personas al año. Las medidas de manejo existentes dependen del uso de fármacos derivados del antimonio para combatir la infección y del control del vector para reducir la transmisión. Actualmente, no existen vacunas disponibles y el desarrollo de estas ha sido insuficiente debido a la diversidad antigénica del parásito y a su ciclo de vida digenético. El Dinucleótido de Adenina y Nicotinamida (NAD+) desempeña funciones esenciales en el metabolismo celular y en la producción energética debido a sus propiedades de transferencia electrónica. Recientes investigaciones han revelado funciones completamente diferentes del NAD+, el cual es utilizado como sustrato en reacciones que involucran modificaciones covalentes de proteínas implicadas en procesos de reparación de ADN, muerte celular y movilización de calcio, tolerancia a condiciones de estrés, control del ciclo circadiano, restricción calórica y control del envejecimiento en numerosos modelos biológicos. Dada la importancia del NAD+ en el metabolismo energético y en la señalización celular, no es sorprendente la existencia de dos vías para su biosíntesis: la vía de novo y la vía de reciclaje. Aunque estas vías se caracterizan por utilizar precursores e intermediarios diferentes, ambas convergen en un único punto enzimático, la Nicotinamida Mononucleótido Adenilil Transferasa (NMNAT; EC 2.7.7.1), enzima fundamental para la supervivencia de todos los organismos debido a que cataliza el paso final en la biosíntesis del NAD+. Con el propósito de identificar blancos que permitan a futuro el desarrollo de estrategias terapéuticas duraderas y de amplio espectro, es indispensable ejecutar investigaciones enfocadas en la caracterización molecular y bioquímica del parasito. Dado que el metabolismo del NAD+ se relaciona con la integridad y mantenimiento de diversos procesos bioquímicos, celulares y fisiológicos esenciales para la supervivencia y proliferación de Leishmania, la investigación y caracterización de las enzimas involucradas en su biosíntesis, constituyen un buen punto de partida. Especialmente la NMNAT puede constituir un blanco relevante debido a que en ella convergen las dos vías de síntesis del NAD+. Estudios previos realizados en nuestro grupo de investigación, permitieron identificar, clonar y expresar la NMNAT de L.braziliensis (LbNMNAT) en el sistema heterólogo Escherichia coli, constituyéndose como el primer acercamiento experimental al metabolismo del NAD+ en esté agente patogénico. Estos estudios se realizaron mediante la ejecución del Trabajo de grado “Aproximación al metabolismo del Dinucleótido de Nicotinamida y Adenina (NAD+) en Leishmania”, el cual fue galardonado recientemente con el premio nacional Otto de Greiff. Queriendo dar continuidad a este estudio, el mismo estudiante, Luis Ernesto Contreras, inicio la maestría en Bioquímica presentando esta propuesta como trabajo de grado, con ella se pretende ampliar tal acercamiento experimental a través de la caracterización estructural y enzimática de la proteína recombinante LbNMNAT. En el marco de esta tesis de maestría, la cual se inicio hace un año, se ha logrado optimizar la expresión y purificación de la LbNMNAT, se ha estandarizado el ensayo enzimático y las mediciones con el HPLC. La aplicación a esta convocatoria tiene como propósito, solicitar recursos que permitan llevar a término el segundo año de este estudio con el total desarrollo de los objetivos inicialmente planteados.