Proyectos
CARACTERIZACIÓN FUNCIONAL DE UN SISTEMA DE EXPRESIÓN GÉNICA INDUCIBLE REGULADO POR TETRACICLINA EN CÉLULAS HEK293FT.
Resumen
La leishmaniasis es una enfermedad parasitaria endémica en 88 países, incluido Colombia, producida por protozoarios flagelados del género Leishmania. En América, Leishmania infantum es el agente etiológico de leishmaniasis visceral, enfermedad que puede ser letal si no se brinda un tratamiento adecuado y que afecta individuos inmuno-comprometidos y niños menores de 5 años. Las actuales soluciones terapéuticas son muy limitadas y cuestionadas por los efectos secundarios observados. A pesar de un volumen importante de investigaciones acerca de la relación Leishmania hospedero, aun se desconocen aspectos claves a nivel celular y molecular de las interacciones entre el parásito y los macrófagos. Recientemente se ha planteado la pertinencia de la implementación de un sistema de expresión y silenciamiento inducible que permite evaluar las interacciones génicas críticas para la ocurrencia y desarrollo de la Leishmaniasis. El presente proyecto tiene como objetivo, caracterizar en términos funcionales la actividad del sistema de expresión génica inducible regulado por tetraciclina en la línea celular HEK293ft empleando como gen reportero la proteína verde fluorescente (GFP), dadas sus bondades como modelo celular de evaluación de ensayos de expresión génica. Este objetivo será alcanzado mediante el logro de los siguiente objetivos específicos: (1) Producir los constructos necesarios para el funcionamiento del sistema de expresión (codificante para la proteína por medio de transformaciones bacterianas, reacciones de recombinación y transfección de células eucariotas, (2) Generar mediante ensayos de transducción una línea celular estable derivada de las células HEK293ft con la propiedad de expresión inducible de GFP regulada por tetraciclina y (3) determinar la cinética de expresión de la proteína GFP en respuesta a dosis variables de tetraciclina por al menos un método bioquímicos (Western Blot, Fluorometría o inmunofluorescencia).
Convocatoria
Nombre de la convocatoria:CONVOCATORIA: "SEMILLEROS DE CREACIÓN E INVESTIGACIÓN DE LA DIB" DE LA DIRECCIÓN DE INVESTIGACIÓN DE BOGOTÁ - SEGUNDO CORTE
Modalidad:Modalidad 2: Apoyo a estudiantes auxiliares para el desarrollo de trabajos investigativos o de creación realizados en el país. SEGUNDO CORTE
Responsable