El hidrógeno es considerado una de las fuentes energéticas alternas de mayor potencial, su alta capacidad energética (superior a la presente en los combustibles fósiles), la versatilidad en su uso y el mínimo impacto que genera durante su aprovechamiento, le confieren ventajas comparativas frente a otras fuentes energéticas alternativas e incluso las convencionales. La obtención de hidrógeno por medios fermentativos (biohidrógeno), es un bioproceso favorable termodinámicamente que permite el uso de sustratos de diversos orígenes, pero su mayor potencial como tecnología se obtiene cuando se emplean sustratos complejos (residuos orgánicos) bajo condiciones termofílicas. En estos casos, si se quiere obtener altos rendimientos en generación de hidrógeno, se deben identificar las rutas metabólicas que siguen las diferentes fuentes de carbono y energía presentes en el sustrato. En el presente proyecto se propone elaborar un protocolo que permita identificar carbohidratos y ácidos orgánicos por HPLC, presentes en una matriz compleja proveniente de una fermentación anaerobia de residuos orgánicos en la cual se haya generado biohidrógeno. Para ello se realizaran fermentaciones anaerobias empleando un bioreactor tipo batch, se elaboraran curvas a diferentes concentraciones de los estándares, se definirá un método de preparación de la matriz, y se realizaran pruebas por cromatografía líquida de alto desempeño con los patrones y las muestras de la fermentación. Finalmente se determinará la selectividad, repetibilidad y precisión del método propuesto, y se elaboraran las curvas cinéticas del consumo de sustrato, formación de ácidos y producción de biohidrógeno.