Proyectos
Diseño, síntesis y caracterización de columnas monolíticas para la separación de biomoléculas
Resumen
La cromatografía líquida de alta eficiencia (HPLC) es uno de los métodos analíticos más ampliamente utilizados por los profesionales del área química, esta técnica permite la separación y análisis de una gran variedad de moléculas. La columna cromatográfica es el corazón de la técnica y su naturaleza química determina sus interacciones con el analito, causantes finalmente de la separación. Los diferentes soportes sólidos han dado origen a varios modos de separación entre los que podemos contar: fase reversa (RP), fase normal (NP), fase reversa no acuosa (NARP), cromatografía de intercambio iónico (IEC), cromatografía de exclusión por tamaño (SEC), cromatografía de interacción hidrofóbica (HIC), cromatografía de interacción hidrofílica (HILIC), cromatografía de afinidad, cromatografía quiral, cromatografía de afinidad con metal inmovilizado (IMAC) y cromatografía de par iónico (IPC). Las columnas empleadas para HPLC, consisten en un tubo que contiene partículas esféricas pequeñas (5 – 10 um de diámetro) cuidadosamente empacadas; generalmente estas partículas son de sílica porosa (poro de 10 – 30 nm), el tamaño de la partícula y su porosidad son los responsables de la eficiencia en la separación y la presión del sistema. La necesidad de analizar biomoléculas (cuyos coeficientes de difusión son muy bajos) ha llevado a la búsqueda de sistemas con una alta transferencia de masa, que se ha logrado disminuyendo el tamaño de las partículas (hasta 1,8 um) lo que causa a su vez la reducción de los espacios intersticiales y de la permeabilidad de la fase móvil que traen como consecuencia un aumento en la presión del sistema, siendo necesario el uso de equipos capaces de trabajar a altas presiones (hasta 1200 bar). Como alternativa a las columnas empacadas se han introducido las columnas monolíticas, que corresponden a un lecho poroso interconectado, estas columnas pueden ser pensadas como una sola partícula porosa que llena la columna entera. La porosidad del monolito (hasta de un 80%) permite el manejo de flujos altos, con los subsecuentes tiempos de análisis cortos, sin pérdida de la eficiencia en la separación ni aumento en la presión del sistema. Los monolitos se pueden obtener del tipo inorgánico (base de sílice) u orgánicos (polímeros). En el presente proyecto se pretende sintetizar monolitos orgánicos y derivatizar su superficie con macrociclos del tipo resorcinarenos, que tienen una cavidad interior que puede generar múltiples interacciones con los analitos (biomoléculas-péptidos) dependiendo de los sustituyentes empleados en su síntesis.
Convocatoria
Nombre de la convocatoria:Convocatoria externa
Modalidad:Convocatoria externa
Responsable