Proyectos
Determinación de la capacidad celulolítica de consorcios de hongos filamentosos en sustratos agroindustriales de interés comercial
Resumen
Teniendo en cuenta la escasez futura de los combustibles fósiles y su demanda creciente, es importante el desarrollo de fuentes alternativas de bioenergía. los materiales lignocelulósicos han sido identificados como la principal fuente de biocombustibles y de otros productos con valor agregado. En la biosfera la celulosa es la forma más abundante de carbono fijado y su degradación está restringida a pocos grupos de microorganismos capaces de producir varios tipos de enzimas, particularmente celulasas. Algunos procesos agroindustriales son fuente de grandes canatidades de celulosa. Es el caso de los racimos vacios, conocidos también como tusas, provenientes del beneficio de la palma de aceite (Eleaeis guinensis), con contenidos de celulosa de alrededor de 47%.Actualmente un alto porcentaje de este material es dejado en el campo para su descomposición natural, un proceso largo, poco eficiente y causante de problemas sanitarios y ambientales. Este proyecto tiene como finalidad optimizar la actividad celulolítica de aislamientos de hongos promisorios procedentes de bosque alto-andino, y de tusa en descomposición usando como sustrato racimos de palma de aceite. Para ello, se evaluará diferentes tratamientos para degradar la lignina presente en los racimos y de esta forma aumentar la disponibilidad de la celulosa a la acción de las enzimas celulolíticas. Los tratamientos corresponden a tres métodos químicos y uno biológico; para este último tratamiento se valorará la actividad degradadora de lignina por basidiomicetos obtenidos a partir de carpóforos ligados a madera en descomposición. Se hará una selección cualitativa por el tamaño de los halos obtnidos en medio sólido con Remazol Brilliant Blue (RBBR), R-478 y guaiacol 2-(CH3O)C6H4OH. Las cepas que muestren reacciones positivas en placa serán crecidas en medio extracto de soya y levadura con guaiacol y tusa como inductores de la actividad degradadora de lignina. La producción de enzima extracelular será medida por monitoreo de la oxidación de ABTS en buffer succinato. Se medirá la actividad de celobiosa deshidrogenasa, mediante la producción de DCPIP usando FeSO4. La reducción de DCPIP de determinará por espectrofotometría. La mejor cepa será utilizada para el pretratamiento de la tusa en medio semisólido. Para el análisis de la actividad celulolítica se examinará actividad endoglucanasa, exoglucanasa y glucosidas, usando como sustratos carboximetil celulosa (CMC) 0.8%, P-nitrophenyl, D-celobiosido (pNPC) 1% y P-nitrophenyl -D. glicopiranósido, de acuerdo con metodologías del laboratorio de Agrobiotecnología de la Facultad de Agonomía de la Univsersidad Nacional de Colombia. Los resultados de los experimentos propuestos serán comparados por análisis de varianza de una vía (ANOVA) y evaluados por la prueba de rango múltiple de Turkey para encontrar las diferencias entre las medias de los tratamientos con un nivel de significancia de 5%. Serán realizadas tres evaluaciones independientes para cada una de las enzimas analizadas en las condiciones in vitro y sobre la fibra de RV, con el fin de obtener datos con significancia estadística.
Convocatoria
Nombre de la convocatoria:CONVOCATORIAS EXTERNAS
Modalidad:PROYECTOS DE CONVOCATORIAS EXTERNAS
Responsable