La tuberculosis (TB) es una enfermedad infectocontagiosa causada por el bacilo ácido alcohol resistente Mycobacterium tuberculosis (Mtb). La TB es una amenaza constante para la salud pública debido a su alta incidencia, la aparición de cepas multi-fármaco-resistentes (MDR) y extremadamente-fármaco-resistentes (XDR), la coinfección con el virus de inmunodeficiencia humana (VIH) y la eficacia limitada de la única vacuna aprobada contra esta enfermedad, la vacuna BCG. El diseño de nuevas herramientas para el control de la TB requiere una mayor comprensión de los mecanismos moleculares utilizados por Mtb para lograr ser un patógeno intracelular exitoso. En este sentido, algunos estudios han demostrado que ciertos transportadores transmembranales desempeñan funciones imprescindibles para las micobacterias, entre ellos, las ATPasas Tipo P. Estas bombas se encargan del transporte activo de iones metálicos, manteniendo de esta forma una adecuada homeostasis iónica celular. También existen otros tipos de transportadores que tienen como función translocar componentes estructurales desde el citosol hacia la pared celular, ayudando así a la construcción de la compleja pared que caracteriza al género Mycobacterium (M.). En el presente proyecto se estudiarán características microbiológicas asociadas a la virulencia de dos mutantes de Mtb, defectivos en genes que codifican para transportadores de membrana: ctpF, que codifica a un transportador implicado en el eflujo Ca2+, y en la respuesta a distintas condiciones asociadas al proceso de infección tales como estrés oxidativo, hipoxia y latencia. Por otra parte, mmpL7, que codifica para una proteína transportadora de lípidos, específicamente el dimicocerosato de tiocerol (PDIM), un reconocido factor de virulencia que posee múltiples implicaciones en la interacción hospedero-patógeno y desempeña un importante rol durante la invasión de macrófagos. A partir de las cepas mutantes MtbH37Rv∆ctpF y MtbH37Rv∆mmpL7 se evaluará el efecto de cada mutación en la morfología colonial, motilidad por deslizamiento y la capacidad en la formación de biopelículas, lo que permitirá reconocer si la ausencia de los genes codificantes de estos transportadores afecta elementos relevantes para la interacción del bacilo tuberculoso con su entorno. Además, se analizará el efecto de la deleción de mmpL7 en el contenido lipídico mediante cromatografía en capa fina, así como el comportamiento transcripcional de algunos genes relacionados con el transporte y biosíntesis de PDIM. Finalmente se analizará el efecto de la deleción de ctpF en la expresión del antígeno inmunomodulador ESAT-6 de Mtb. Todo lo anterior será de utilidad en la construcción a futuro de un doble mutante de Mtb (MtbH37Rv::∆ctpF∆mmpL7) con potencial vacunal.