Proyectos
--Detección de Orthomyxovirus en quirópteros Colombianos
Resumen
El virus de Influenza A es un patógeno de gran relevancia tanto en salud animal como en salud humana constituyéndose en un problema importante en salud pública. Este virus se caracteriza por tener un amplio rango de huéspedes y presentar una alta variabilidad, lo que hace necesario conocer epidemiología en el país; enfatizando la necesidad de entender la dinámica interaccion de la infección en humanos, animales domésticos y silvestres bajo el concepto de One Health(1) La gran similitud en las condiciones agroecológicas y geopolíticas que comparten los países de Centro y Sur América, los hace poseedores de un gran número de especies silvestres(2), susceptibles a numerosos agentes infecciosos(3), dentro de estos el agente etiológico de la influenza(4,5); del cual se han reportado nuevos subtipos en murciélagos de Guatemala y Perú, en el primero se detectó el subtipo H17N10 en Sturnira lilium(6), en el segundo surge el subtipo H18N11 en Artibeus planirostris(7), ambas especies de amplia distribución en Meso y Suramérica Debido al total desconocimiento de la presencia de estos virus en murciélagos nacionales, este es un campo de estudio altamente promisorio. Para comprender a cabalidad la dinámica epidemiológica del virus en el país, se deben tener muy en cuenta sus reservorios naturales, potenciales eliminadores virales y/o diseminadores activos, con repercusiones virales y/o zooantroponóticas/antropozoonóticas(8,9), con este fin el presente estudio busca determinar la presencia de Orthomixovirus en quirópteros Colombianos La colecta de ejemplares y obtención de muestras contará con la colaboración del equipo de trabajo de la Fundación Reserva Natural La Palmita Centro de investigación, que posee gran experticia en ecología, manejo e identificación taxonómica de mamíferos neotropicales. Debido a la dificultad intrínseca de investigación en fauna se estableció un número de 50 ejemplares, distribuidos en diferentes especies de animales, a los cuales se les tomarán hisopados oro-rectales y muestras de intestino, pulmón, hígado, riñón, bazo y cerebro, en tarjetas FTA y RNAlater(10,11) Las muestras se analizarán en el Laboratorio de Virología de la Universidad Nacional de Colombia con más de 30 años de experiencia en virología animal, 10 años de trabajo en la detección, aislamiento y caracterización molecular de Influenzavirus y posee la infraestructura necesarias para tal fin. Allí se llevará a cabo la extracción de RNA a partir de las muestras preservadas en RNAlater empleando kits comerciales (QIAampViralRNAMini y RNeasy). Se realizarán tres qRT-PCR con la enzima SuperScript III Platinum One-Step en un LightCycler480II por triplicado. Se usarán primers y sondas diseñados para identificar el gen de proteína M(12) del virus de Influenza A. Posteriormente se usarán primers y sonda diseñados para el subtipo H17N10(13), teniendo también como secuencia blanco, una porción del gen M. Finalmente se usarán cebadores y sonda que identifican una secuencia del gen de la nucleoproteína(6,7). Como gen de control interno se usará el citocromoB, altamente conservado en pequeños mamíferos, dentro de estos el orden Chiroptera(15,16) Además de determinar la positividad en las muestras, se establecerán estrategias que permitan maximizar los especímenes de vida silvestre como fuente importante de agentes virales. La ejecución de este proyecto determinará molecularmente la presencia de Orthomyxovirus en quirópteros Colombianos, detectando virus de Influenza A que afectan diferentes especies de aves y mamíferos, incluído el hombre, así como de virus Influenza A-like reportados en quirópteros; contribuyendo así al conocimiento de la infección por virus de influenza y la interacción virus-huésped lo cual ayudará a esclarecer la intrincada dinámica que posee este complejo pero fascinante agente viral. Además servirá para establecer estrategias que permitan maximizar los especimenes silvestres como fuentes importantes de agentes virales.
Convocatoria
Nombre de la convocatoria:CONVOCATORIA NACIONAL DE PROYECTOS PARA EL FORTALECIMIENTO DE LA INVESTIGACIÓN, CREACIÓN E INNOVACIÓN DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA 2016-2018
Modalidad:Modalidad Única
Responsable